Určení krevní skupiny
Existence krevních skupin systému AB0 je podmíněna přítomností lipoproteinů na cytoplazmatické membráně erytrocytů a
přirozených pravidelných protilátek v krevním séru nebo plazmě. Vyšetření krevních skupin se provádí jak vyšetřením
aglutinogenů, které jsou vázány na povrchu erytrocytů za použití specifických diagnostik, tak vyšetřením aglutininů
krevního séra pomocí diagnostických erytrocytů. Vyšetření se provádí na automatickém analyzátoru ORTHO Vision nebo
manuálně na kartách. Principem je sloupcová aglutinace na kartách se skleněnými kuličkami. Vyšetření na sklíčku je pouze
orientační. Do každé série vyšetření je nutné zařadit pozitivní a negativní kontrolu.
Vzorky krve k testování krevních skupin jsou asepticky odebrány do antikoagulačních roztoků a musí být uskladněny při +2
až +8°C. Vzorky odebrané přednostně do K3EDTA musí být testovány do 48 hodin po odběru. Stanovení krevní skupiny u všech
pacientů starších 6 měsíců musí být provedeno vyšetřením antigenů na krvinkách spolu s vyšetřením protilátek v
plazmě/séru diagnostickými krvinkami. U novorozenců (nejsou protilátky v séru) by měla být ABO skupina ověřena
opakovaným (2x) vyšetřením antigenů.
Antigeny krevní skupiny A se rozdělují do několika podskupin, z nichž nejvýznamnější je A1 a A2. K vyšetření podskupin
A1 - A2 (A1B - A2B) se vždy používá současně diagnostikum specifičnosti anti-A1 (lidské nebo lektin) a anti-H (zvířecí
nebo lektin). U pacientů podskupin A1, A2, A1B a A2B se mohou v séru/plazmě vyskytovat nepravidelné aglutininy anti-A1
nebo anti-H.
Určení Rh D
Rh D antigen je tvořen molekulou lipoproteinu o přibližné molekulární hmotnosti 30000 kDa. Tento protein je typický pro
červené krvinky, erytrocyty. Geny, kódující povrchové proteiny pro Rh krevní skupiny (antigeny C, c, D, d, E, e) jsou
lokalizovány na třech různých lokusech jednoho chromozomu. Přítomnost D antigenu podmiňuje tzv. Rh positivitu krve.
Stanovení antigenu Rh D u pacientů před transfuzí krve se provádí testováním ve zkumavkách dvěma typy monoklonálních
diagnostik, které nesmí detekovat antigen DVI: jedno Anti-D obsahující protilátky typu IgM a druhé anti-D obsahující
směs protilátek povahy IgM a IgG. Jejich účinnost a specifičnost se vždy ověřuje kontrolními erytrocyty Rh pozitivními a
Rh negativními. Pro stanovení Rh u pacientů před transfuzí krve není vhodný nepřímý antiglobulinový (Coombsův ) test ve
kterém se v reakci uplatňuje protilátka povahy IgG. Součástí vyšetření Rh každé vyšetřované osoby je souběžné testování
erytrocytů s Rh kontrolním diagnostikem. Pouze v případě negativity kontrolního testování je výsledek vyšetření Rh u
dané osoby validní. U všech dárců krve, těhotných žen a novorozenců, u nichž je výsledek Rh D negativní se provádí
vyšetření DVI/v , tj. slabší alely antigenu D. K vyšetření se využívá diagnostikum povahy IgG a testování se provádí
nepřímým antiglobulinovým (Coombsovým) testem.
|